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技術(shù)文章

人過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α(PGC-1α)訂購

更新時(shí)間:2022-09-05 瀏覽次數(shù):1691

本試劑盒只能用于科學(xué)研究高質量,不得用于醫(yī)學(xué)診斷

Human過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α(PGC-1α)ELISA檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)充分發揮。往預(yù)先包被過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α(PGC-1α)抗體的包被微孔中選擇適用,依次加入標(biāo)本管理、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體業務指導,經(jīng)過溫育并*洗滌改進措施。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色長足發展,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色今年。顏色的深淺和樣品中的過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α(PGC-1α)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)結構不合理,計(jì)算樣品濃度動手能力。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管意見征詢,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激提升,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離的必然要求。

2.  血漿:EDTA研究成果、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清完善好。

3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物大面積。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清問題分析。

5.  保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測培養,請按一次用量分裝,凍存于-20℃更加完善,避免反復(fù)凍融形式,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL資源配置、2-20uL即將展開、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1.  試劑盒保存在2-8℃特性,使用前室溫平衡20分鐘傳承。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正辰ㄑ灾边_,F(xiàn)象多種,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中充分發揮,密封(低溫干燥)保存發展成就。

3.  濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白成就;按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度開展面對面。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間系統、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻進一步提升。

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標(biāo)板

12孔×8條

12孔×4條

標(biāo)準(zhǔn)品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進(jìn)行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個(gè)

1個(gè)

注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0空間廣闊、25、50改革創新、100知識和技能、200、400 nmol/L

試劑的準(zhǔn)備

 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋新模式,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水實現。

洗板方法

1.  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液組織了,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體服務體系,在吸水紙上拍干,如此洗板5次服務為一體。

2.  自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL問題,浸泡1min,洗板5次全會精神。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條系統穩定性,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔集中展示,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL實力增強;

3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL共享;空白孔不加信息化。

4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL生動,用封板膜封住反應(yīng)孔新型儲能,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體新品技,吸水紙上拍干範圍,每孔加滿洗滌液,靜置1min紮實做,甩去洗滌液空間廣闊,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)提供深度撮合服務。

6.  每孔加入底物A服務品質、B各50μL的發生,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL影響,15min內(nèi)新的動力,在450nm波長處測定各孔的OD值。


試劑盒性能

1.  性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值指導,大于等于0.9900廣泛認同。

2.  靈敏度:檢測濃度小于1.0 nmol/L國際要求。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)流動性。

4.  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%競爭激烈。

5.  貯藏:2-8℃持續創新,避光防潮保存。

6.  有效期:6個(gè)月

免責(zé)聲明

1.   試劑盒僅供研究使用空白區,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或體實(shí)驗(yàn)協調機製,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)形勢,本公司概不負(fù)責(zé)實踐者。

  嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作約定管轄,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)數據。


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