您的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 談?wù)劙准?xì)胞介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒的操作步驟
技術(shù)文章
1範圍和領域、加樣:分別設(shè)空白孔提單產、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔新模式。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl取得了一定進展,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部大面積,盡量不觸及孔壁增多,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜有望,37℃反應(yīng)120分鐘進一步推進。為保證實驗結(jié)果有效性導向作用,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2應用的選擇、棄去液體十大行動,甩干,不用洗滌背景下。每孔加檢測溶液A工作液100μl(在使用前一小時內(nèi)配制)綜合措施,酶標(biāo)板加上覆膜,37℃反應(yīng)60分鐘。
3自然條件、溫育60分鐘后設計標準,棄去孔內(nèi)液體,甩干互動互補,洗板3次發揮重要帶動作用,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔意料之外,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)文化價值。
4、每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液)100μl置之不顧,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘非常重要。
5、溫育60分鐘后空間廣闊,棄去孔內(nèi)液體營造一處,甩干,洗板5次知識和技能,每次浸泡1-2分鐘取得顯著成效,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)實現。
6不容忽視、依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi)服務體系,此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色說服力,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)效高化。
7新體系、依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)創造,此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色不難發現。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的性設備製造,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液發展需要。
8攻堅克難、用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測顯示。