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產(chǎn)品中心簡要描述:禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD 值),與CUT OFF值相比較,從而判定標(biāo)本中禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)的存在與否
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 96T,48T |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 僅供科研 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 | 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
保存條件 | 2-8℃ | 檢測(cè)方法 | 一步間接法 |
實(shí)驗(yàn)儀器 | 酶標(biāo)儀 | 樣本類型 | 血清、血漿合理需求、細(xì)胞上清液等 |
特色服務(wù) | 免費(fèi)代測(cè) |
禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備:
1) 確定試劑盒在有效期內(nèi)
2) 仔細(xì)閱讀說明書,按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量充分發揮、體積)
3) 提前準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需的設(shè)備(如離心機(jī)高質量、37℃恒溫箱、高精度加樣器及槍頭選擇適用、酶標(biāo)儀等)
4) 標(biāo)本制備要規(guī)范管理,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份業務指導。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者注意低溫保存改進措施。根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
5) 按說明書將所有試劑平衡至室溫,配制所需試劑長足發展。嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)步驟奮勇向前。
檢測(cè)原理:試劑盒采用一步間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被腦脊髓炎病毒(AEV)抗原的包被微孔中實施體系,依次加入標(biāo)本組建、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗抗體,經(jīng)過溫育并洗滌發揮。用底物TMB顯色顯著,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色開放以來。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD 值),與CUT OFF值相比較高質量,從而判定標(biāo)本中禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)的存在與否提供了有力支撐。
樣品收集、處理及保存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份前景。用無菌管收集細(xì)胞上清液進一步意見,以1000×g離心15分鐘,收集上清共享應用。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次生產能力,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融示範推廣,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份堅持好,或者細(xì)胞超聲粉碎即將展開,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下特性,血液自然凝固傳承,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)建言直達。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑多種,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘充分發揮,收集上清發展成就。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液重要方式,分泌物等互動式宣講。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘模式,收集上清開展。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg發揮重要帶動作用,加入500ul 的PBS意向,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿文化價值,以2000-3000 rmp離心20 分鐘形式,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3不斷完善,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性數字化。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝基礎上,-80 ℃保存各領域,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀保持競爭優勢,應(yīng)再次離心進行培訓。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒長效機製,檢測(cè)前先離心或過濾法治力量。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍分享。
禽腦脊髓炎病毒抗體(AEV-Ab)elisa試劑盒結(jié)果判斷
1. 試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00共享;
陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15。
2. 臨界值(Cut off)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),樣品為陰性
4. 陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off)生動,樣品為陽性
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